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人生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒技術解析與應用指南

更新時間:2025-04-02      瀏覽次數:223

人生長分化因子15(GDF15)ELISA試劑盒技術解析與應用指南

上海仁捷生物科技有限公司

摘要

人生長分化因子15(Growth Differentiation Factor 15,GDF15)是一種重要的細胞應激反應蛋白,在多種病理生理過程中發揮關鍵作用。本文詳細介紹了上海仁捷生物科技有限公司自主研發的GDF15 ELISA試劑盒的技術原理、性能參數、操作流程及典型應用案例,為研究人員提供全面的技術參考。

1. 產品概述

1.1 GDF15生物學意義

GDF15屬于TGF-β超家族成員,又稱MIC-1(macrophage inhibitory cytokine-1),具有以下重要功能:

  • 調控能量代謝平衡

  • 參與炎癥反應

  • 影響腫瘤發生發展

  • 與心血管疾病密切相關

1.2 上海仁捷GDF15 ELISA試劑盒特點

  • 高靈敏度:檢測下限達10 pg/mL

  • 寬檢測范圍:50-1600 pg/mL

  • 優異特異性:不與TGF-β家族其他成員交叉反應

  • 穩定可靠:批內變異系數<8%,批間變異系數<10%

  • 多種樣本適用:血清、血漿、細胞培養上清等

2. 技術原理

2.1 雙抗體夾心ELISA原理

本試劑盒采用經典雙抗體夾心法:

  1. 包被:高親和力抗GDF15單抗預包被于微孔板

  2. 結合:樣本中GDF15與包被抗體特異性結合

  3. 檢測:加入生物素標記的二抗

  4. 信號放大:鏈霉親和素-HRP復合物結合

  5. 顯色:TMB底物顯色反應

2.2 檢測系統優化

  • 抗體配對:經過嚴格篩選的高效抗體對

  • 信號放大:生物素-親和素放大系統

  • 干擾控制:特殊緩沖體系降低基質效應

3. 實驗操作指南

3.1 樣本處理建議

樣本類型處理方法注意事項
血清室溫凝固30min后,2000×g離心15min避免溶血
血漿EDTA抗凝,離心去除血小板及時分離
細胞上清0.22μm濾膜過濾避免反復凍融

3.2 標準操作流程

  1. 試劑準備(室溫平衡30min)

  2. 加樣(標準品/樣本各100μL)

  3. 37℃孵育90min

  4. 洗板(自動洗板機推薦)

  5. 加檢測抗體(100μL/孔)

  6. 37℃孵育60min

  7. 洗板

  8. 加酶結合物(100μL/孔)

  9. 37℃孵育30min

  10. 洗板

  11. 顯色(TMB,15min)

  12. 終止反應

  13. 450nm讀數

3.3 數據分析

  • 四參數擬合標準曲線

  • 質控要求:R2≥0.99

  • 推薦使用專業ELISA分析軟件

4. 典型應用案例

4.1 心血管疾病研究

案例:急性心肌梗死患者血清GDF15動態監測
方法:收集50例AMI患者發病后0、6、12、24、48h血清樣本
結果:GDF15水平在發病6h顯著升高,與心肌損傷程度正相關(r=0.72)

4.2 腫瘤研究

案例:結直腸癌患者預后評估
方法:檢測120例患者術前血清GDF15水平
結果:高GDF15組(>200pg/mL)5年生存率顯著低于低水平組(38% vs 72%)

4.3 代謝性疾病研究

案例:2型糖尿病肥胖患者干預研究
方法:檢測生活方式干預前后GDF15變化
結果:有效減重組GDF15下降幅度顯著(P<0.01)

5. 常見問題解決方案

5.1 技術問題排查

問題現象可能原因解決方案
標準曲線不佳標準品溶解不充分充分震蕩混勻
背景值高洗板不充分增加洗滌次數
重復性差操作不一致統一操作手法

5.2 結果解讀要點

  • 注意樣本采集時間(晝夜節律影響)

  • 考慮藥物干擾(如二甲雙胍可升高GDF15)

  • 結合臨床其他指標綜合分析

6. 產品服務支持

6.1 上海仁捷特色服務

  • 免費技術咨詢:專業團隊提供實驗設計指導

  • 方法學驗證服務:協助完成方法學比對

  • 定制化服務:可根據需求調整檢測范圍

關鍵詞:GDF15、ELISA試劑盒、上海仁捷生物、心血管標志物、腫瘤標志物、代謝調控


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